Obrigado por visitar Nature.com.A versão do navegador que você está usando tem suporte CSS limitado.Para obter melhores resultados, recomendamos que você use uma versão mais recente do seu navegador (ou desative o Modo de Compatibilidade no Internet Explorer).Enquanto isso, para garantir suporte contínuo, mostramos o site sem estilo ou JavaScript.
Combinações de compostos inseticidas derivados de plantas podem apresentar interações sinérgicas ou antagônicas contra pragas.Dada a rápida propagação de doenças transmitidas pelos mosquitos Aedes e a crescente resistência das populações de mosquitos Aedes aos inseticidas tradicionais, vinte e oito combinações de compostos terpênicos à base de óleos essenciais de plantas foram formuladas e testadas contra os estágios larvais e adultos do Aedes aegypti.Cinco óleos essenciais de plantas (OE) foram inicialmente avaliados quanto à sua eficácia larvicida e para uso em adultos, e dois compostos principais foram identificados em cada OE com base nos resultados de GC-MS.Foram adquiridos os principais compostos identificados, nomeadamente dissulfeto de dialila, trissulfeto de dialila, carvona, limoneno, eugenol, metil eugenol, eucaliptol, eudesmol e mosquito alfa-pineno.Combinações binárias destes compostos foram então preparadas utilizando doses subletais e seus efeitos sinérgicos e antagônicos foram testados e determinados.As melhores composições larvicidas são obtidas misturando limoneno com dissulfeto de dialila, e as melhores composições adulticidas são obtidas misturando carvona com limoneno.O larvicida sintético Temphos, utilizado comercialmente, e o medicamento adulto Malathion foram testados separadamente e em combinações binárias com terpenóides.Os resultados mostraram que a combinação de temefós e dissulfeto de dialila e malatião e eudesmol foi a combinação mais eficaz.Essas combinações potentes têm potencial para uso contra o Aedes aegypti.
Os óleos essenciais de plantas (OE) são metabólitos secundários que contêm vários compostos bioativos e estão se tornando cada vez mais importantes como alternativa aos pesticidas sintéticos.Não só são ecológicos e fáceis de utilizar, como também são uma mistura de diferentes compostos bioactivos, o que também reduz a probabilidade de desenvolvimento de resistência aos medicamentos1.Usando a tecnologia GC-MS, os pesquisadores examinaram os constituintes de vários óleos essenciais de plantas e identificaram mais de 3.000 compostos de 17.500 plantas aromáticas2, a maioria das quais foram testadas quanto às propriedades inseticidas e relatadas como tendo efeitos inseticidas3,4.Alguns estudos destacam que a toxicidade do componente principal do composto é igual ou superior à do seu óxido de etileno bruto.Mas a utilização de compostos individuais pode novamente deixar espaço para o desenvolvimento de resistência, como é o caso dos insecticidas químicos5,6.Portanto, o foco atual está na preparação de misturas de compostos à base de óxido de etileno para melhorar a eficácia inseticida e reduzir a probabilidade de resistência em populações-alvo de pragas.Os compostos ativos individuais presentes nos OEs podem exibir efeitos sinérgicos ou antagônicos em combinações que refletem a atividade global do OE, fato que foi bem enfatizado em estudos conduzidos por pesquisadores anteriores7,8.O programa de controle vetorial também inclui OE e seus componentes.A atividade mosquitocida dos óleos essenciais tem sido extensivamente estudada em mosquitos Culex e Anopheles.Vários estudos tentaram desenvolver pesticidas eficazes combinando várias plantas com pesticidas sintéticos utilizados comercialmente para aumentar a toxicidade global e minimizar os efeitos secundários9.Mas os estudos de tais compostos contra o Aedes aegypti permanecem raros.Os avanços na ciência médica e o desenvolvimento de medicamentos e vacinas ajudaram a combater algumas doenças transmitidas por vetores.Mas a presença de diferentes sorotipos do vírus, transmitido pelo mosquito Aedes aegypti, tem levado ao fracasso dos programas de vacinação.Portanto, quando tais doenças ocorrem, os programas de controlo de vectores são a única opção para prevenir a propagação da doença.No cenário atual, o controle do Aedes aegypti é muito importante, pois é um vetor chave de vários vírus e seus sorotipos causadores da dengue, Zika, dengue hemorrágica, febre amarela, etc. os casos de quase todas as doenças transmitidas por vetores pelo Aedes estão aumentando a cada ano no Egito e em todo o mundo.Portanto, neste contexto, há uma necessidade urgente de desenvolver medidas de controle ambientalmente corretas e eficazes para as populações de Aedes aegypti.Os candidatos potenciais a este respeito são os OE, os seus compostos constituintes e as suas combinações.Portanto, este estudo tentou identificar combinações sinérgicas eficazes de compostos-chave de OE de plantas de cinco plantas com propriedades inseticidas (ou seja, hortelã, manjericão sagrado, eucalipto manchado, enxofre de Allium e melaleuca) contra Aedes aegypti.
Todos os OEs selecionados demonstraram potencial atividade larvicida contra Aedes aegypti com CL50 de 24 horas variando de 0,42 a 163,65 ppm.A maior atividade larvicida foi registrada para OE de hortelã-pimenta (Mp) com valor de CL50 de 0,42 ppm às 24 h, seguido pelo alho (As) com valor de CL50 de 16,19 ppm às 24 h (Tabela 1).
Com exceção de Ocimum Sainttum, Os EO, todos os outros quatro OE selecionados mostraram efeitos alercidas óbvios, com valores de LC50 variando de 23,37 a 120,16 ppm durante o período de exposição de 24 horas.O OE de Thymophilus striata (Cl) foi mais eficaz em matar adultos com um valor de CL50 de 23,37 ppm dentro de 24 horas após a exposição, seguido por Eucalyptus maculata (Em) que teve um valor de CL50 de 101,91 ppm (Tabela 1).Por outro lado, o valor LC50 para Os ainda não foi determinado, uma vez que a maior taxa de mortalidade de 53% foi registada na dose mais elevada (Figura 3 suplementar).
Os dois principais compostos constituintes em cada OE foram identificados e selecionados com base nos resultados do banco de dados da biblioteca NIST, porcentagem da área do cromatograma GC e resultados dos espectros MS (Tabela 2).Para EO As, os principais compostos identificados foram dissulfeto de dialila e trissulfeto de dialila;para o OE Mp os principais compostos identificados foram a carvona e o limoneno, para o OE Em os principais compostos identificados foram o eudesmol e o eucaliptol;Para EO Os, os principais compostos identificados foram eugenol e metil eugenol, e para EO Cl, os principais compostos identificados foram eugenol e α-pineno (Figura 1, Figuras Suplementares 5–8, Tabela Suplementar 1–5).
Resultados da espectrometria de massa dos principais terpenóides de óleos essenciais selecionados (A-dissulfeto de dialila; B-dialil trissulfeto; C-eugenol; D-metil eugenol; E-limoneno; F-ceperona aromática; G-α-pineno; H-cineol ; R-eudamol).
Um total de nove compostos (dissulfeto de dialila, trissulfeto de dialila, eugenol, metil eugenol, carvona, limoneno, eucaliptol, eudesmol, α-pineno) foram identificados como compostos eficazes que são os principais componentes do OE e foram bioensaiados individualmente contra Aedes aegypti em larvas. estágios..O composto eudesmol apresentou maior atividade larvicida com valor de CL50 de 2,25 ppm após 24 horas de exposição.Descobriu-se também que os compostos dissulfeto de dialila e trissulfeto de dialila apresentam potenciais efeitos larvicidas, com doses subletais médias na faixa de 10 a 20 ppm.Atividade larvicida moderada foi novamente observada para os compostos eugenol, limoneno e eucaliptol com valores de CL50 de 63,35 ppm, 139,29 ppm.e 181,33 ppm após 24 horas, respectivamente (Tabela 3).Contudo, não foi encontrado potencial larvicida significativo do metil eugenol e da carvona mesmo nas doses mais elevadas, portanto os valores de CL50 não foram calculados (Tabela 3).O larvicida sintético Temefós apresentou concentração letal média de 0,43 ppm contra Aedes aegypti ao longo de 24 horas de exposição (Tabela 3, Tabela Suplementar 6).
Sete compostos (dissulfeto de dialila, trissulfeto de dialila, eucaliptol, α-pineno, eudesmol, limoneno e carvona) foram identificados como os principais compostos de OE eficaz e foram testados individualmente contra mosquitos Aedes egípcios adultos.De acordo com a análise de regressão Probit, descobriu-se que o Eudesmol tinha o maior potencial com um valor de CL50 de 1,82 ppm, seguido pelo Eucaliptol com um valor de CL50 de 17,60 ppm no tempo de exposição de 24 horas.Os cinco compostos restantes testados foram moderadamente prejudiciais para adultos com CL50 variando de 140,79 a 737,01 ppm (Tabela 3).O malatião organofosforado sintético foi menos potente que o eudesmol e maior que os outros seis compostos, com um valor de LC50 de 5,44 ppm durante o período de exposição de 24 horas (Tabela 3, Tabela Suplementar 6).
Sete compostos líderes potentes e o tamefosato organofosforado foram selecionados para formular combinações binárias de suas doses de CL50 em uma proporção de 1:1.Um total de 28 combinações binárias foram preparadas e testadas quanto à sua eficácia larvicida contra Aedes aegypti.Nove combinações foram consideradas sinérgicas, 14 combinações foram antagônicas e cinco combinações não foram larvicidas.Dentre as combinações sinérgicas, a combinação de dissulfeto de dialila e temofol foi a mais eficaz, com 100% de mortalidade observada após 24 horas (Tabela 4).Da mesma forma, misturas de limoneno com dissulfeto de dialila e eugenol com timetfos apresentaram bom potencial com mortalidade larval observada de 98,3% (Tabela 5).As restantes 4 combinações, nomeadamente eudesmol mais eucaliptol, eudesmol mais limoneno, eucaliptol mais alfa-pineno, alfa-pineno mais temefós, também apresentaram eficácia larvicida significativa, com taxas de mortalidade observadas superiores a 90%.A taxa de mortalidade esperada é próxima de 60-75%.(Tabela 4).Porém, a combinação de limoneno com α-pineno ou eucalipto apresentou reações antagônicas.Da mesma forma, descobriu-se que misturas de Temefós com eugenol ou eucalipto ou eudesmol ou trissulfeto de dialila têm efeitos antagônicos.Da mesma forma, a combinação de dissulfureto de dialilo e trissulfureto de dialilo e a combinação de qualquer um destes compostos com eudesmol ou eugenol são antagónicas na sua acção larvicida.Também foi relatado antagonismo com a combinação de eudesmol com eugenol ou α-pineno.
De todas as 28 misturas binárias testadas para atividade ácida em adultos, 7 combinações foram sinérgicas, 6 não tiveram efeito e 15 foram antagônicas.As misturas de eudesmol com eucalipto e limoneno com carvona foram mais eficazes do que outras combinações sinérgicas, com taxas de mortalidade em 24 horas de 76% e 100%, respectivamente (Tabela 5).Observou-se que o malatião exibe um efeito sinérgico com todas as combinações de compostos, exceto limoneno e trissulfeto de dialila.Por outro lado, foi encontrado antagonismo entre dissulfeto de dialila e trissulfeto de dialila e a combinação de qualquer um deles com eucalipto, ou eucaliptol, ou carvona, ou limoneno.Da mesma forma, combinações de α-pineno com eudesmol ou limoneno, eucaliptol com carvona ou limoneno e limoneno com eudesmol ou malatião apresentaram efeitos larvicidas antagônicos.Para as seis combinações restantes, não houve diferença significativa entre a mortalidade esperada e a observada (Tabela 5).
Com base em efeitos sinérgicos e doses subletais, a sua toxicidade larvicida contra um grande número de mosquitos Aedes aegypti foi finalmente selecionada e testada posteriormente.Os resultados mostraram que a mortalidade larval observada utilizando as combinações binárias eugenol-limoneno, dialil dissulfeto-limoneno e dialil dissulfeto-timefós foi de 100%, enquanto a mortalidade larval esperada foi de 76,48%, 72,16% e 63,4%, respectivamente (Tabela 6)..A combinação de limoneno e eudesmol foi relativamente menos eficaz, com 88% de mortalidade larval observada durante o período de exposição de 24 horas (Tabela 6).Em resumo, as quatro combinações binárias selecionadas também demonstraram efeitos larvicidas sinérgicos contra o Aedes aegypti quando aplicadas em larga escala (Tabela 6).
Três combinações sinérgicas foram selecionadas para o bioensaio adultocida para controlar grandes populações de Aedes aegypti adultos.Para selecionar combinações para testar em grandes colônias de insetos, primeiro nos concentramos nas duas melhores combinações sinérgicas de terpenos, ou seja, carvona mais limoneno e eucaliptol mais eudesmol.Em segundo lugar, a melhor combinação sinérgica foi selecionada a partir da combinação de organofosfato malatião sintético e terpenóides.Acreditamos que a combinação de malatião e eudesmol é a melhor combinação para testes em grandes colônias de insetos devido à maior mortalidade observada e aos valores muito baixos de CL50 dos ingredientes candidatos.O malatião exibe sinergismo em combinação com α-pineno, dissulfeto de dialila, eucalipto, carvona e eudesmol.Mas se olharmos para os valores de CL50, o Eudesmol tem o valor mais baixo (2,25 ppm).Os valores calculados de CL50 de malatião, α-pineno, dissulfeto de dialila, eucaliptol e carvona foram 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 e 140,79 ppm.respectivamente.Esses valores indicam que a combinação de malatião e eudesmol é a combinação ideal em termos de dosagem.Os resultados mostraram que as combinações de carvona mais limoneno e eudesmol mais malatião tiveram 100% de mortalidade observada em comparação com uma mortalidade esperada de 61% a 65%.Outra combinação, eudesmol mais eucaliptol, apresentou taxa de mortalidade de 78,66% após 24 horas de exposição, em comparação com uma taxa de mortalidade esperada de 60%.Todas as três combinações selecionadas demonstraram efeitos sinérgicos mesmo quando aplicadas em larga escala contra Aedes aegypti adultos (Tabela 6).
Neste estudo, OEs de plantas selecionados, como Mp, As, Os, Em e Cl, mostraram efeitos letais promissores nos estágios larval e adulto do Aedes aegypti.O OE Mp apresentou a maior atividade larvicida com um valor de CL50 de 0,42 ppm, seguido pelos OEs As, Os e Em com um valor de CL50 inferior a 50 ppm após 24 h.Estes resultados são consistentes com estudos anteriores de mosquitos e outras moscas dípteras10,11,12,13,14.Embora a potência larvicida do Cl seja inferior à de outros óleos essenciais, com um valor de CL50 de 163,65 ppm após 24 horas, seu potencial adulto é o mais alto com um valor de CL50 de 23,37 ppm após 24 horas.Os OEs Mp, As e Em também apresentaram bom potencial alercida com valores de CL50 na faixa de 100–120 ppm em 24 horas de exposição, mas foram relativamente inferiores à sua eficácia larvicida.Por outro lado, os EO Os demonstraram um efeito alercida insignificante mesmo na dose terapêutica mais elevada.Assim, os resultados indicam que a toxicidade do óxido de etileno para as plantas pode variar dependendo do estágio de desenvolvimento dos mosquitos15.Depende também da taxa de penetração dos OEs no corpo do inseto, da sua interação com enzimas alvo específicas e da capacidade de desintoxicação do mosquito em cada estágio de desenvolvimento16.Um grande número de estudos tem demonstrado que o composto componente principal é um fator importante na atividade biológica do óxido de etileno, uma vez que representa a maioria dos compostos totais3,12,17,18.Portanto, consideramos dois compostos principais em cada OE.Com base nos resultados de GC-MS, o dissulfeto de dialila e o trissulfeto de dialila foram identificados como os principais compostos de EO As, o que é consistente com relatórios anteriores .Embora relatórios anteriores indicassem que o mentol era um dos seus principais compostos, a carvona e o limoneno foram novamente identificados como os principais compostos do Mp EO22,23.O perfil de composição do Os EO mostrou que o eugenol e o metil eugenol são os principais compostos, o que é semelhante aos achados de pesquisadores anteriores .O eucaliptol e o eucaliptol têm sido relatados como os principais compostos presentes no óleo das folhas de Em, o que é consistente com os achados de alguns pesquisadores25,26, mas contrário aos achados de Olalade et al.27.A dominância de cineol e α-pineno foi observada no óleo essencial de melaleuca, o que é semelhante a estudos anteriores28,29.Diferenças intraespecíficas na composição e concentração de óleos essenciais extraídos da mesma espécie vegetal em diferentes locais foram relatadas e também observadas neste estudo, que são influenciadas pelas condições geográficas de crescimento da planta, época de colheita, estágio de desenvolvimento ou idade da planta.aparecimento de quimiotipos, etc.22,30,31,32.Os principais compostos identificados foram então adquiridos e testados quanto aos seus efeitos larvicidas e sobre os mosquitos Aedes aegypti adultos.Os resultados mostraram que a atividade larvicida do dissulfeto de dialila era comparável à do EO As bruto.Mas a atividade do trissulfeto de dialila é maior que a do EO As.Estes resultados são semelhantes aos obtidos por Kimbaris et al.33 em Culex Filipinas.No entanto, estes dois compostos não apresentaram boa atividade autocida contra os mosquitos alvo, o que é consistente com os resultados de Plata-Rueda et al 34 sobre Tenebrio molitor.Os OE são eficazes contra a fase larval do Aedes aegypti, mas não contra a fase adulta.Foi estabelecido que a atividade larvicida dos principais compostos individuais é inferior à do Os EO bruto.Isto implica um papel para outros compostos e suas interações no óxido de etileno bruto.O metil eugenol sozinho tem atividade insignificante, enquanto o eugenol sozinho tem atividade larvicida moderada.Esta conclusão confirma, por um lado,35,36 e, por outro lado, contradiz as conclusões de investigadores anteriores37,38.Diferenças nos grupos funcionais do eugenol e do metileugenol podem resultar em diferentes toxicidades para o mesmo inseto alvo39.Verificou-se que o limoneno tinha atividade larvicida moderada, enquanto o efeito da carvona era insignificante.Da mesma forma, a toxicidade relativamente baixa do limoneno para insetos adultos e a alta toxicidade da carvona apoiam os resultados de alguns estudos anteriores40, mas contradizem outros41.A presença de ligações duplas nas posições intracíclica e exocíclica pode aumentar os benefícios desses compostos como larvicidas3,41, enquanto a carvona, que é uma cetona com carbonos alfa e beta insaturados, pode apresentar maior potencial de toxicidade em adultos42.No entanto, as características individuais do limoneno e da carvona são muito inferiores ao Mp total do EO (Tabela 1, Tabela 3).Entre os terpenóides testados, o eudesmol apresentou a maior atividade larvicida e adulta, com um valor de LC50 abaixo de 2,5 ppm, tornando-o um composto promissor para o controle dos mosquitos Aedes.Seu desempenho é melhor que o de todo o OE Em, embora isso não seja consistente com os achados de Cheng et al.40.O eudesmol é um sesquiterpeno com duas unidades de isopreno menos volátil que os monoterpenos oxigenados como o eucalipto e, portanto, tem maior potencial como pesticida.O próprio eucaliptol tem maior atividade adulta do que larvicida, e os resultados de estudos anteriores apoiam e refutam isso37,43,44.A atividade por si só é quase comparável à de todo o EO Cl.Outro monoterpeno bicíclico, o α-pineno, tem menos efeito adulto sobre o Aedes aegypti do que efeito larvicida, que é o oposto do efeito do EO Cl completo.A atividade inseticida geral dos terpenóides é influenciada por sua lipofilicidade, volatilidade, ramificação de carbono, área de projeção, área de superfície, grupos funcionais e suas posições .Esses compostos podem atuar destruindo acúmulos celulares, bloqueando a atividade respiratória, interrompendo a transmissão de impulsos nervosos, etc. 47 Descobriu-se que o organofosforado sintético Temefos tem a maior atividade larvicida com um valor de LC50 de 0,43 ppm, o que é consistente com os dados de Lek - Utala48.A atividade adulta do organofosforado malatião sintético foi relatada em 5,44 ppm.Embora estes dois organofosforados tenham mostrado respostas favoráveis contra cepas laboratoriais de Aedes aegypti, a resistência dos mosquitos a estes compostos tem sido relatada em diferentes partes do mundo49.Contudo, não foram encontrados relatos semelhantes sobre o desenvolvimento de resistência a medicamentos fitoterápicos50.Assim, os produtos botânicos são considerados alternativas potenciais aos pesticidas químicos em programas de controle de vetores.
O efeito larvicida foi testado em 28 combinações binárias (1:1) preparadas a partir de terpenóides potentes e terpenóides com timetfos, e 9 combinações foram consideradas sinérgicas, 14 antagônicas e 5 antagônicas.Nenhum efeito.Por outro lado, no bioensaio de potência em adultos, 7 combinações foram consideradas sinérgicas, 15 combinações foram antagônicas e 6 combinações foram relatadas como não tendo efeito.A razão pela qual certas combinações produzem um efeito sinérgico pode ser devido aos compostos candidatos interagindo simultaneamente em diferentes vias importantes, ou à inibição sequencial de diferentes enzimas-chave de uma via biológica específica51.A combinação de limoneno com dissulfeto de dialila, eucalipto ou eugenol foi considerada sinérgica em aplicações de pequena e grande escala (Tabela 6), enquanto sua combinação com eucalipto ou α-pineno apresentou efeitos antagônicos nas larvas.Em média, o limoneno parece ser um bom sinérgico, possivelmente devido à presença de grupos metil, boa penetração no estrato córneo e um mecanismo de ação diferente52,53.Foi anteriormente relatado que o limoneno pode causar efeitos tóxicos ao penetrar nas cutículas dos insectos (toxicidade por contacto), afectar o sistema digestivo (antialimentante) ou afectar o sistema respiratório (actividade de fumigação), 54 enquanto os fenilpropanóides como o eugenol podem afectar as enzimas metabólicas 55. Portanto, combinações de compostos com diferentes mecanismos de ação podem aumentar o efeito letal global da mistura.Descobriu-se que o eucaliptol é sinérgico com dissulfeto de dialila, eucalipto ou α-pineno, mas outras combinações com outros compostos foram não larvicidas ou antagônicas.Estudos iniciais mostraram que o eucaliptol tem atividade inibitória sobre a acetilcolinesterase (AChE), bem como sobre os receptores de octaamina e GABA56.Uma vez que os monoterpenos cíclicos, o eucaliptol, o eugenol, etc. podem ter o mesmo mecanismo de acção que a sua actividade neurotóxica, 57 minimizando assim os seus efeitos combinados através da inibição mútua.Da mesma forma, a combinação de Temefós com dissulfeto de dialila, α-pineno e limoneno foi considerada sinérgica, apoiando relatos anteriores de um efeito sinérgico entre produtos fitoterápicos e organofosforados sintéticos58.
Descobriu-se que a combinação de eudesmol e eucaliptol tem efeito sinérgico nos estágios larval e adulto do Aedes aegypti, possivelmente devido aos seus diferentes modos de ação devido às suas diferentes estruturas químicas.O eudesmol (um sesquiterpeno) pode afetar o sistema respiratório 59 e o eucaliptol (um monoterpeno) pode afetar a acetilcolinesterase 60 .A co-exposição dos ingredientes a dois ou mais locais alvo pode aumentar o efeito letal global da combinação.Em bioensaios com substâncias adultas, descobriu-se que o malatião é sinérgico com carvona ou eucaliptol ou eucaliptol ou dissulfureto de dialilo ou α-pineno, indicando que é sinérgico com a adição de limoneno e di.Bons candidatos alercidas sinérgicos para todo o portfólio de compostos terpênicos, com exceção do trissulfeto de alila.Thangam e Kathiresan61 também relataram resultados semelhantes do efeito sinérgico do malatião com extratos de ervas.Esta resposta sinérgica pode ser devida aos efeitos tóxicos combinados do malatião e dos fitoquímicos nas enzimas desintoxicantes dos insectos.Organofosforados como o malatião geralmente atuam inibindo esterases e monooxigenases do citocromo P45062,63,64.Portanto, a combinação de malatião com estes mecanismos de ação e terpenos com diferentes mecanismos de ação pode aumentar o efeito letal geral sobre os mosquitos.
Por outro lado, o antagonismo indica que os compostos seleccionados são menos activos em combinação do que cada composto isoladamente.A razão para o antagonismo em algumas combinações pode ser que um composto modifica o comportamento do outro composto, alterando a taxa de absorção, distribuição, metabolismo ou excreção.Os primeiros pesquisadores consideraram que esta era a causa do antagonismo nas combinações de drogas.Moléculas Mecanismo possível 65. Da mesma forma, as possíveis causas de antagonismo podem estar relacionadas com mecanismos de acção semelhantes, competição de compostos constituintes pelo mesmo receptor ou local alvo.Em alguns casos, também pode ocorrer inibição não competitiva da proteína alvo.Neste estudo, dois compostos organossulfurados, dissulfeto de dialila e trissulfeto de dialila, apresentaram efeitos antagônicos, possivelmente devido à competição pelo mesmo sítio alvo.Da mesma forma, esses dois compostos de enxofre apresentaram efeitos antagônicos e não tiveram efeito quando combinados com eudesmol e α-pineno.O eudesmol e o alfa-pineno são de natureza cíclica, enquanto o dissulfeto de dialila e o trissulfeto de dialila são de natureza alifática.Com base na estrutura química, a combinação destes compostos deve aumentar a atividade letal global, uma vez que os seus locais alvo são geralmente diferentes , mas experimentalmente encontramos antagonismo, o que pode ser devido ao papel destes compostos em alguns organismos desconhecidos in vivo.sistemas como resultado da interação.Da mesma forma, a combinação de cineol e α-pineno produziu respostas antagônicas, embora pesquisadores tenham relatado anteriormente que os dois compostos têm alvos de ação diferentes47,60.Uma vez que ambos os compostos são monoterpenos cíclicos, pode haver alguns locais alvo comuns que podem competir pela ligação e influenciar a toxicidade global dos pares combinatórios estudados.
Com base nos valores de CL50 e na mortalidade observada, foram selecionadas as duas melhores combinações sinérgicas de terpenos, nomeadamente os pares de carvona + limoneno e eucaliptol + eudesmol, bem como o organofosforado sintético malatião com terpenos.A combinação sinérgica ideal de compostos malatião + Eudesmol foi testada em um bioensaio de inseticida para adultos.Almeje grandes colônias de insetos para confirmar se essas combinações eficazes podem funcionar contra um grande número de indivíduos em espaços de exposição relativamente grandes.Todas estas combinações demonstram um efeito sinérgico contra grandes enxames de insetos.Resultados semelhantes foram obtidos para uma combinação larvicida sinérgica ideal testada contra grandes populações de larvas de Aedes aegypti.Assim, pode-se dizer que a combinação larvicida e adulticida sinérgica eficaz de compostos de OE de plantas é uma forte candidata contra os produtos químicos sintéticos existentes e pode ser usada posteriormente para controlar as populações de Aedes aegypti.Da mesma forma, combinações eficazes de larvicidas ou adulticidas sintéticos com terpenos também podem ser usadas para reduzir as doses de timetfos ou malatião administradas aos mosquitos.Estas potentes combinações sinérgicas podem fornecer soluções para estudos futuros sobre a evolução da resistência aos medicamentos em mosquitos Aedes.
Ovos de Aedes aegypti foram coletados no Centro Regional de Pesquisa Médica, Dibrugarh, Conselho Indiano de Pesquisa Médica e mantidos sob temperatura controlada (28 ± 1 °C) e umidade (85 ± 5%) no Departamento de Zoologia da Universidade Gauhati sob o seguintes condições: Arivoli foi descrito et al.Após a eclosão, as larvas foram alimentadas com ração larval (biscoito para cães em pó e fermento na proporção de 3:1) e os adultos foram alimentados com solução de glicose a 10%.A partir do terceiro dia após a emergência, os mosquitos fêmeas adultos foram autorizados a sugar o sangue de ratos albinos.Mergulhe o papel de filtro em água em um copo e coloque-o na gaiola de postura.
Amostras de plantas selecionadas, nomeadamente folhas de eucalipto (Myrtaceae), manjericão sagrado (Lamiaceae), hortelã (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) e bulbos de allium (Amaryllidaceae).Coletado em Guwahati e identificado pelo Departamento de Botânica da Universidade Gauhati.As amostras de plantas coletadas (500 g) foram submetidas à hidrodestilação em aparelho Clevenger por 6 horas.O OE extraído foi coletado em frascos de vidro limpos e armazenado a 4°C para estudo posterior.
A toxicidade larvicida foi estudada utilizando procedimentos padrão da Organização Mundial de Saúde ligeiramente modificados 67 .Use DMSO como emulsificante.Cada concentração de OE foi inicialmente testada em 100 e 1000 ppm, expondo 20 larvas em cada repetição.Com base nos resultados, foi aplicada uma faixa de concentração e registrada a mortalidade de 1 hora a 6 horas (em intervalos de 1 hora), e às 24 horas, 48 horas e 72 horas após o tratamento.As concentrações subletais (CL50) foram determinadas após 24, 48 e 72 horas de exposição.Cada concentração foi testada em triplicado juntamente com um controle negativo (somente água) e um controle positivo (água tratada com DMSO).Se ocorrer pupação e mais de 10% das larvas do grupo controle morrerem, o experimento é repetido.Se a taxa de mortalidade no grupo de controle estiver entre 5-10%, use a fórmula de correção Abbott 68.
O método descrito por Ramar et al.69 foi utilizado para um bioensaio em adultos contra Aedes aegypti utilizando acetona como solvente.Cada OE foi inicialmente testado contra mosquitos adultos Aedes aegypti em concentrações de 100 e 1000 ppm.Aplique 2 ml de cada solução preparada ao número Whatman.1 pedaço de papel filtro (tamanho 12 x 15 cm2) e deixe a acetona evaporar por 10 minutos.Papel filtro tratado com apenas 2 ml de acetona foi utilizado como controle.Após a evaporação da acetona, o papel de filtro tratado e o papel de filtro de controle são colocados em um tubo cilíndrico (10 cm de profundidade).Dez mosquitos sem sangue com 3 a 4 dias de idade foram transferidos para triplicados de cada concentração.Com base nos resultados dos testes preliminares, foram testadas diversas concentrações de óleos selecionados.A mortalidade foi registrada 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 5 horas, 6 horas, 24 horas, 48 horas e 72 horas após a liberação do mosquito.Calcule os valores de LC50 para tempos de exposição de 24 horas, 48 horas e 72 horas.Se a taxa de mortalidade do lote de controlo exceder 20%, repetir todo o teste.Da mesma forma, se a taxa de mortalidade no grupo controle for superior a 5%, ajustar os resultados para as amostras tratadas utilizando a fórmula de Abbott68.
Cromatografia gasosa (Agilent 7890A) e espectrometria de massa (Accu TOF GCv, Jeol) foram realizadas para analisar os compostos constituintes dos óleos essenciais selecionados.O GC foi equipado com detector FID e coluna capilar (HP5-MS).O gás de arraste foi o hélio, a vazão foi de 1 ml/min.O programa GC define Allium sativum para 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M e Ocimum Sainttum para 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, para hortelã 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, para eucalipto 20,60-1M-10-200-3M-30-280, e para vermelho Para mil camadas são eles 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Os principais compostos de cada OE foram identificados com base na porcentagem de área calculada a partir do cromatograma GC e dos resultados da espectrometria de massa (referenciados ao banco de dados de padrões NIST 70).
Os dois compostos principais em cada OE foram selecionados com base nos resultados de GC-MS e adquiridos da Sigma-Aldrich com pureza de 98-99% para bioensaios adicionais.Os compostos foram testados quanto à eficácia larvicida e em adultos contra Aedes aegypti conforme descrito acima.Os larvicidas sintéticos mais comumente usados, o tamefosato (Sigma Aldrich) e o medicamento para adultos malatião (Sigma Aldrich), foram analisados para comparar sua eficácia com compostos OE selecionados, seguindo o mesmo procedimento.
Misturas binárias de compostos terpênicos selecionados e compostos terpênicos mais organofosfatos comerciais (tilefós e malatião) foram preparadas misturando a dose LC50 de cada composto candidato em uma proporção de 1:1.As combinações preparadas foram testadas em estágios larvais e adultos de Aedes aegypti conforme descrito acima.Cada bioensaio foi realizado em triplicado para cada combinação e em triplicado para os compostos individuais presentes em cada combinação.A morte dos insetos alvo foi registrada após 24 horas.Calcule a taxa de mortalidade esperada para uma mistura binária usando a seguinte fórmula.
onde E = taxa de mortalidade esperada dos mosquitos Aedes aegypti em resposta a uma combinação binária, ou seja, conexão (A + B).
O efeito de cada mistura binária foi rotulado como sinérgico, antagônico ou nenhum efeito com base no valor de χ2 calculado pelo método descrito por Pavla52.Calcule o valor χ2 para cada combinação usando a seguinte fórmula.
O efeito de uma combinação foi definido como sinérgico quando o valor de χ2 calculado foi maior que o valor da tabela para os graus de liberdade correspondentes (intervalo de confiança de 95%) e se a mortalidade observada excedeu a mortalidade esperada.Da mesma forma, se o valor de χ2 calculado para qualquer combinação exceder o valor da tabela com alguns graus de liberdade, mas a mortalidade observada for inferior à mortalidade esperada, o tratamento é considerado antagônico.E se em qualquer combinação o valor calculado de χ2 for menor que o valor da tabela nos graus de liberdade correspondentes, a combinação é considerada sem efeito.
Três a quatro combinações potencialmente sinérgicas (100 larvas e 50 atividades larvicidas e de insetos adultos) foram selecionadas para testes contra um grande número de insetos.Adultos) proceda como acima.Junto com as misturas, os compostos individuais presentes nas misturas selecionadas também foram testados em números iguais de larvas e adultos de Aedes aegypti.A proporção de combinação é uma parte da dose LC50 de um composto candidato e parte da dose LC50 do outro composto constituinte.No bioensaio de atividade de adultos, os compostos selecionados foram dissolvidos no solvente acetona e aplicados em papel filtro envolto em recipiente plástico cilíndrico de 1300 cm3.A acetona foi evaporada durante 10 minutos e os adultos foram liberados.Da mesma forma, no bioensaio larvicida, doses de compostos candidatos LC50 foram primeiro dissolvidas em volumes iguais de DMSO e depois misturadas com 1 litro de água armazenada em recipientes plásticos de 1300 cc, e as larvas foram liberadas.
A análise probabilística de 71 dados de mortalidade registrados foi realizada utilizando SPSS (versão 16) e software Minitab para calcular os valores de CL50.
Horário da postagem: 01/07/2024