A recente redução da incidência de malária na Costa do Marfim deve-se, em grande parte, ao uso de mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN). No entanto, esse progresso está ameaçado pela resistência aos inseticidas, pelas mudanças comportamentais nas populações de Anopheles gambiae e pela transmissão residual da malária, o que torna necessária a utilização de ferramentas adicionais. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do uso combinado de LLIN e Bacillus thuringiensis (Bti) e compará-la com o uso isolado de LLIN.
O estudo foi conduzido de março de 2019 a fevereiro de 2020 em dois grupos (grupo LLIN + Bti e grupo LLIN apenas) na região de saúde de Korhogo, no norte da Costa do Marfim. No grupo LLIN + Bti, os criadouros de larvas de Anopheles foram tratados com Bti a cada duas semanas, além da aplicação de LLIN. Larvas e mosquitos adultos foram coletados e identificados morfologicamente em nível de gênero e espécie utilizando métodos padrão. A infecção pelo complexo gambiano foi determinada utilizando a tecnologia de reação em cadeia da polimerase (PCR). A incidência de malária na Gâmbia e na população local também foi avaliada.
De forma geral, a densidade larval de Anopheles spp. foi menor no grupo LLIN + Bti em comparação com o grupo LLIN isolado: 0,61 [IC 95% 0,41–0,81] larvas/mergulho (l/mergulho) 3,97 [IC 95% 3,56–4,38] l/mergulho (RR = 6,50; IC 95% 5,81–7,29; P < 0,001). A velocidade geral de picada de An. gambiae foi de 0,59 [IC 95% 0,43–0,75] por pessoa/noite no grupo LLIN + Bti isolado, em comparação com 2,97 [IC 95% 2,02–3,93] picadas por pessoa/noite no grupo LLIN isolado (P < 0,001). Anopheles gambiae sl é identificado principalmente como o mosquito Anopheles. Anopheles gambiae (ss) (95,1%; n = 293), seguido por Anopheles gambiae (4,9%; n = 15). O índice de sangue humano na área de estudo foi de 80,5% (n = 389). A taxa de incidência de malária (TIM) para o grupo LLIN + Bti foi de 1,36 picadas infectadas por pessoa por ano (ib/p/a), enquanto a TIM para o grupo LLIN isolado foi de 47,71 ib/p/a. A incidência de malária diminuiu acentuadamente de 291,8‰ (n = 765) para 111,4‰ (n = 292) no grupo LLIN + Bti (P < 0,001).
A combinação de mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN) e Bti reduziu significativamente a incidência de malária. Essa combinação pode ser uma abordagem integrada promissora para o controle eficaz de An. Gâmbia está livre da malária.
Apesar dos progressos no controle da malária nas últimas décadas, a carga da doença continua sendo um grande problema na África subsaariana [1]. A Organização Mundial da Saúde (OMS) relatou recentemente que houve 249 milhões de casos de malária e cerca de 608.000 mortes relacionadas à doença em todo o mundo em 2023 [2]. A Região Africana da OMS responde por 95% dos casos de malária e 96% das mortes por malária no mundo, sendo as gestantes e as crianças menores de 5 anos as mais afetadas [2, 3].
As redes mosquiteiras impregnadas com inseticida de longa duração (LLIN) e a pulverização residual intradomiciliar (IRS) desempenharam um papel fundamental na redução da carga da malária na África [4]. A expansão dessas ferramentas de controle do vetor da malária resultou em uma redução de 37% na incidência da doença e de 60% na mortalidade entre 2000 e 2015 [5]. No entanto, as tendências observadas desde 2015 estagnaram alarmantemente ou até mesmo se aceleraram, com as mortes por malária permanecendo inaceitavelmente altas, especialmente na África Subsaariana [3]. Diversos estudos identificaram o surgimento e a disseminação da resistência do principal vetor da malária, o mosquito Anopheles, aos inseticidas utilizados em saúde pública como uma barreira à eficácia futura das LLIN e da IRS [6,7,8]. Além disso, mudanças no comportamento de picada dos vetores ao ar livre e mais cedo à noite são responsáveis pela transmissão residual da malária e representam uma preocupação crescente [9,10]. As limitações das LLIN e da IRS no controle dos vetores responsáveis pela transmissão residual são uma das principais limitações dos esforços atuais para a eliminação da malária [11]. Além disso, a persistência da malária é explicada pelas condições climáticas e pelas atividades humanas, que contribuem para a criação de habitat larval [12].
O manejo de criadouros larvais (MCL) é uma abordagem de controle vetorial baseada em criadouros que visa reduzir o número de criadouros e o número de larvas e pupas de mosquitos neles contidas [13]. O MCL tem sido recomendado por diversos estudos como uma estratégia integrada adicional para o controle vetorial da malária [14, 15]. De fato, a eficácia do MCL proporciona um benefício duplo contra as picadas de espécies vetoras da malária, tanto em ambientes internos quanto externos [4]. Além disso, o controle vetorial com MCL à base de larvicidas, como o Bacillus thuringiensis israelensis (Bti), pode ampliar o leque de opções para o controle da malária. Historicamente, o MCL desempenhou um papel fundamental no controle bem-sucedido da malária nos Estados Unidos, Brasil, Egito, Argélia, Líbia, Marrocos, Tunísia e Zâmbia [16, 17, 18]. Embora o MCL tenha desempenhado um papel importante no manejo integrado de pragas em alguns países que erradicaram a malária, ele não foi amplamente integrado às políticas e práticas de controle vetorial da malária na África, sendo utilizado apenas em programas de controle vetorial em alguns países da África Subsaariana. países [14,15,16,17,18,19]. Uma das razões para isso é a crença generalizada de que os criadouros são muito numerosos e difíceis de encontrar, tornando o manejo de larvicidas muito caro de implementar [4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 13, 14]. Portanto, a Organização Mundial da Saúde recomenda há décadas que os recursos mobilizados para o controle do vetor da malária se concentrem em mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN) e pulverização residual intradomiciliar (IRS) [20, 21]. Foi somente em 2012 que a Organização Mundial da Saúde recomendou a integração do manejo de larvicidas, particularmente intervenções com Bti, como complemento aos LLIN e à IRS em certos contextos na África Subsaariana [20]. Desde que a OMS fez essa recomendação, vários estudos-piloto foram conduzidos sobre a viabilidade, eficácia e custo de biolarvicidas na África Subsaariana, demonstrando a eficácia do manejo de larvicidas na redução da densidade de mosquitos Anopheles e na eficiência da transmissão da malária em termos de [22, 23, 24].
A Costa do Marfim está entre os 15 países com a maior carga de malária no mundo [25]. A prevalência de malária na Costa do Marfim representa 3,0% da carga global da doença, com incidência e número de casos estimados variando de 300 a mais de 500 por 1000 habitantes [25]. Apesar da longa estação seca, de novembro a maio, a malária se dissemina durante todo o ano na região de savana do norte do país [26]. A transmissão da malária nessa região está associada à presença de um grande número de portadores assintomáticos de Plasmodium falciparum [27]. Nessa região, o vetor mais comum da malária é o Anopheles gambiae (SL). Os mosquitos Anopheles gambiae são principalmente da espécie Anopheles gambiae (SS), que é altamente resistente a inseticidas e, portanto, representa um alto risco de transmissão residual da malária [26]. O uso de mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN) pode ter impacto limitado na redução da transmissão da malária devido à resistência dos vetores locais aos inseticidas, sendo, portanto, uma área de grande preocupação. Estudos-piloto utilizando Bti ou LLIN demonstraram eficácia na redução da densidade de mosquitos vetores no norte da Costa do Marfim. No entanto, nenhum estudo anterior avaliou o efeito de aplicações repetidas de Bti combinadas com LLIN na transmissão e incidência da malária nessa região. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do uso combinado de LLIN e Bti na transmissão da malária, comparando o grupo LLIN + Bti com o grupo LLIN isoladamente em quatro aldeias da região norte da Costa do Marfim. A hipótese era de que a implementação de um sistema de manejo da malária baseado em Bti, em conjunto com o uso de LLIN, agregaria valor, reduzindo ainda mais a densidade de mosquitos transmissores da malária em comparação com o uso de LLIN isoladamente. Essa abordagem integrada, que visa mosquitos Anopheles imaturos portadores de Bti e mosquitos Anopheles adultos portadores de mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN), pode ser crucial para reduzir a transmissão da malária em áreas de alta endemicidade, como aldeias no norte da Costa do Marfim. Portanto, os resultados deste estudo podem auxiliar na decisão sobre a inclusão do monitoramento de mosquitos Anopheles em programas nacionais de controle de vetores da malária (PNCM) em países endêmicos da África Subsaariana.
O presente estudo foi realizado em quatro aldeias do departamento de Napieldougou (também conhecido como Napier) na zona sanitária de Korhogo, no norte da Costa do Marfim (Fig. 1). Aldeias em estudo: Kakologo (9° 14′ 2″ N, 5° 35′ 22″ E), Kolekakha (9° 17′ 24″ N, 5° 31′ 00″ E.), Lofinekaha (9° 17′ 31″). ) 5° 36′ 24″ N) e Nambatiurkaha (9° 18′ 36″ N, 5° 31′ 22″ E). A população de Napierledougou em 2021 foi estimada em 31.000 habitantes, e a província é composta por 53 aldeias com dois centros de saúde [28]. Na província de Napierledougou, onde a malária é a principal causa de consultas médicas, hospitalizações e mortalidade, apenas as redes mosquiteiras impregnadas com inseticida de longa duração (LLIN) são utilizadas para o controle dos vetores Anopheles [29]. Todas as quatro aldeias em ambos os grupos de estudo são atendidas pelo mesmo centro de saúde, cujos registros clínicos de casos de malária foram revisados neste estudo.
Mapa da Costa do Marfim mostrando a área de estudo. (Fonte do mapa e software: dados GADM e ArcMap 10.6.1. LLIN: rede mosquiteira impregnada com inseticida de longa duração; Bti: Bacillus thuringiensis israelensis)
A prevalência de malária na população-alvo do Centro de Saúde de Napier atingiu 82,0% (2038 casos) (dados pré-Bti). Nas quatro aldeias, as famílias utilizam apenas mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração PermaNet® 2.0, distribuídos pelo Programa Nacional de Controle da Malária da Costa do Marfim em 2017, com cobertura superior a 80% [25, 26, 27, 28, 30]. As aldeias pertencem à região de Korhogo, que serve como ponto de observação para o Conselho Militar Nacional da Costa do Marfim e é acessível durante todo o ano. Cada uma das quatro aldeias tem pelo menos 100 famílias e aproximadamente a mesma população e, de acordo com o registro de saúde (um documento de trabalho do Ministério da Saúde da Costa do Marfim), vários casos de malária são relatados a cada ano. A malária é causada principalmente pelo Plasmodium falciparum (P. falciparum) e é transmitida aos humanos pelo Plasmodium gambiae, também transmitido pelos mosquitos Anopheles e Anopheles nili na região [28]. Complexo local An. gambiae consiste principalmente de mosquitos Anopheles. gambiae ss tem uma alta frequência de mutações kdr (intervalo de frequência: 90,70–100%) e uma frequência moderada de alelos ace-1 (intervalo de frequência: 55,56–95%) [29].
A precipitação média anual varia de 1200 a 1400 mm e a temperatura média anual varia de 21 a 35 °C, e a umidade relativa (UR) é estimada em 58%. Esta área de estudo possui um clima do tipo sudanês, com uma estação seca de 6 meses (novembro a abril) e uma estação chuvosa de 6 meses (maio a outubro). A região está sofrendo alguns dos efeitos das mudanças climáticas, como a perda de vegetação e uma estação seca mais longa, caracterizada pelo ressecamento de corpos d'água (terras baixas, arrozais, lagoas, poças) que podem servir de habitat para larvas do mosquito Anopheles. Mosquitos[26].
O estudo foi conduzido no grupo LLIN + Bti, representado pelas aldeias de Kakologo e Nambatiurkaha, e no grupo LLIN apenas, representado pelas aldeias de Kolekaha e Lofinekaha. Durante o período deste estudo, as pessoas em todas essas aldeias estavam usando apenas o mosquiteiro impregnado com inseticida de longa duração PermaNet® 2.0.
A eficácia da rede mosquiteira impregnada com inseticida de longa duração (LLIN, PermaNet 2.0) em combinação com Bti contra mosquitos Anopheles e a transmissão da malária foi avaliada em um ensaio clínico randomizado (ECR) com dois braços de estudo: o grupo LLIN + Bti (grupo de tratamento) e o grupo LLIN isoladamente (grupo controle). As mangas LLIN + Bti são representadas por Kakologo e Nambatiourkaha, enquanto Kolékaha e Lofinékaha foram projetadas como mangas apenas para uso com LLIN. Nas quatro aldeias, os moradores locais utilizam a rede LLIN PermaNet® 2.0 recebida do Programa Nacional de Controle da Malária da Costa do Marfim em 2017. Presume-se que as condições de uso da PermaNet® 2.0 sejam as mesmas nas diferentes aldeias, visto que a rede foi recebida da mesma forma. No grupo LLIN + Bti, os criadouros de larvas de Anopheles foram tratados com Bti a cada duas semanas, além da LLIN já utilizada pela população. Os habitats larvais dentro das aldeias e num raio de 2 km do centro de cada aldeia foram tratados de acordo com as recomendações da Organização Mundial da Saúde e do NMCP da Costa do Marfim [31]. Em contraste, o grupo LLIN apenas não recebeu tratamento larvicida com Bti durante o período do estudo.
Uma forma granular dispersível em água de Bti (Vectobac WG, 37,4% em peso; número do lote 88-916-PG; 3000 Unidades Internacionais de Toxicidade UI/mg; Valent BioScience Corp, EUA) foi utilizada na dose de 0,5 mg/L. Utilizou-se um pulverizador costal de 16 L e uma pistola de fibra de vidro com cabo e bico ajustável, com vazão de 52 ml por segundo (3,1 L/min). Para preparar um nebulizador contendo 10 L de água, a quantidade de Bti diluída na suspensão é de 0,5 mg/L × 10 L = 5 mg. Por exemplo, para uma área com vazão de água projetada de 10 L, utilizando um pulverizador de 10 L para tratar um volume de água, a quantidade de Bti que precisa ser diluída é de 0,5 mg/L × 20 L = 10 mg. A quantidade de 10 mg de Bti foi medida em campo utilizando uma balança eletrônica. Utilizando uma espátula, prepare uma suspensão misturando esta quantidade de Bti em um balde graduado de 10 L. Esta dose foi selecionada após testes de campo sobre a eficácia do Bti contra vários estágios larvais de Anopheles spp. e Culex spp. em condições naturais, em uma área diferente, mas semelhante à área da pesquisa atual [32]. A taxa de aplicação da suspensão larvicida e a duração da aplicação para cada criadouro foram calculadas com base no volume estimado de água no criadouro [33]. Aplique o Bti utilizando um pulverizador manual calibrado. Os nebulizadores são calibrados e testados durante os exercícios individuais e em diferentes áreas para garantir a aplicação da quantidade correta de Bti.
Para determinar o melhor momento para tratar os criadouros de larvas, a equipe identificou a pulverização em janelas de tempo ideal. A janela de pulverização é o período durante o qual um produto é aplicado para atingir a eficácia ideal: neste estudo, a janela de pulverização variou de 12 horas a 2 semanas, dependendo da persistência do Bti. Aparentemente, a absorção do Bti pelas larvas no criadouro requer um período entre 7h e 18h. Dessa forma, períodos de chuva intensa podem ser evitados, quando a chuva significa interromper a pulverização e reiniciá-la no dia seguinte, se o tempo permitir. As datas e horários exatos da pulverização dependem das condições climáticas observadas. Para calibrar os pulverizadores costais para a taxa de aplicação de Bti desejada, cada técnico é treinado para inspecionar visualmente e ajustar o bico do pulverizador e manter a pressão. A calibração é concluída verificando se a quantidade correta de tratamento com Bti é aplicada uniformemente por unidade de área. O habitat das larvas é tratado a cada duas semanas. As atividades larvicidas são realizadas com o apoio de quatro especialistas experientes e bem treinados. As atividades larvicidas e os participantes são supervisionados por supervisores experientes. O tratamento larvicida teve início em março de 2019, durante a estação seca. De fato, um estudo anterior demonstrou que a estação seca é o período mais adequado para a intervenção larvicida devido à estabilidade dos criadouros e à redução de sua abundância [27]. Espera-se que o controle das larvas durante a estação seca previna a atração de mosquitos durante a estação chuvosa. Dois (02) quilogramas de Bti, ao custo de US$ 99,29, permitem que o grupo de estudo que recebeu o tratamento cubra todas as áreas. No grupo LLIN+Bti, a intervenção larvicida durou um ano inteiro, de março de 2019 a fevereiro de 2020. Um total de 22 casos de tratamento larvicida ocorreram no grupo LLIN + Bti.
Os possíveis efeitos colaterais (como coceira, tontura ou coriza) foram monitorados por meio de pesquisas individuais com nebulizadores de larvicida biológico Bti e com moradores das residências participantes do grupo LIN + Bti.
Foi realizado um levantamento domiciliar em 400 domicílios (200 domicílios por grupo de estudo) para estimar a porcentagem de uso de mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLINs) na população. No levantamento domiciliar, utilizou-se um questionário quantitativo. A prevalência do uso de LLINs foi dividida em três faixas etárias: 15 anos. O questionário foi preenchido e explicado no idioma local, Senoufo, ao chefe da família ou a outro adulto maior de 18 anos.
O tamanho mínimo da família pesquisada foi calculado usando a fórmula descrita por Vaughan e Morrow [34].
n é o tamanho da amostra, e é a margem de erro, t é o fator de segurança derivado do nível de confiança e p é a proporção de pais da população com o atributo em questão. Cada elemento da fração tem um valor consistente, portanto (t) = 1,96; o tamanho mínimo da família nesta situação na pesquisa foi de 384 famílias.
Antes do experimento atual, diferentes tipos de habitat para larvas de Anopheles nos grupos LLIN+Bti e LLIN foram identificados, amostrados, descritos, georreferenciados e etiquetados. Utilize uma fita métrica para medir o tamanho da colônia de nidificação. As densidades de larvas de mosquito foram então avaliadas mensalmente durante 12 meses em 30 criadouros selecionados aleatoriamente por aldeia, totalizando 60 criadouros por grupo de estudo. Foram realizadas 12 amostragens de larvas por área de estudo, correspondendo a 22 tratamentos com Bti. O objetivo da seleção desses 30 criadouros por aldeia foi capturar um número suficiente de locais de coleta de larvas em todas as aldeias e unidades de estudo para minimizar o viés. As larvas foram coletadas por meio de coleta com uma colher de 60 ml [35]. Devido ao fato de alguns criadouros serem muito pequenos e rasos, é necessário utilizar um balde menor do que o balde padrão da OMS (350 ml). Foram realizadas 5, 10 ou 20 coletas em criadouros com circunferência de 10 m, respectivamente. A identificação morfológica das larvas coletadas (por exemplo, Anopheles, Culex e Aedes) foi realizada diretamente no campo [36]. As larvas coletadas foram divididas em duas categorias com base no estágio de desenvolvimento: larvas de ínstar inicial (estágios 1 e 2) e larvas de ínstar tardio (estágios 3 e 4) [37]. As larvas foram contadas por gênero e em cada estágio de desenvolvimento. Após a contagem, as larvas de mosquito são reintroduzidas em suas áreas de reprodução e repostas ao seu volume original com água da fonte suplementada com água da chuva.
Um criadouro foi considerado positivo se pelo menos uma larva ou pupa de qualquer espécie de mosquito estivesse presente. A densidade larval foi determinada dividindo-se o número de larvas do mesmo gênero pelo número de mergulhos.
Cada estudo teve duração de dois dias consecutivos e, a cada dois meses, mosquitos adultos foram coletados em 10 residências selecionadas aleatoriamente em cada aldeia. Ao longo do estudo, cada equipe de pesquisa realizou levantamentos amostrais em 20 residências durante três dias consecutivos. Os mosquitos foram capturados utilizando armadilhas de janela padrão (WT) e armadilhas de spray de piretro (PSC) [38, 39]. Inicialmente, todas as casas de cada aldeia foram numeradas. Quatro casas em cada aldeia foram então selecionadas aleatoriamente como pontos de coleta de mosquitos adultos. Em cada casa selecionada aleatoriamente, os mosquitos foram coletados no quarto principal. Os quartos selecionados possuem portas e janelas e estavam ocupados na noite anterior. Os quartos permanecem fechados antes do início do trabalho e durante a coleta de mosquitos para evitar que os mosquitos saiam do quarto. Uma WT foi instalada em cada janela de cada quarto como ponto de amostragem de mosquitos. No dia seguinte, os mosquitos que entraram no local de trabalho vindos dos quartos foram coletados entre 6h e 8h da manhã. Colete os mosquitos da sua área de trabalho utilizando um bocal e armazene-os em um copo de papel descartável coberto com um pedaço de pano. Mosquiteiro. Os mosquitos que pousavam no mesmo quarto foram capturados imediatamente após a coleta, utilizando PSC à base de piretroide. Após estender lençóis brancos no chão do quarto, feche as portas e janelas e aplique o inseticida (ingredientes ativos: 0,25% de transflutrina + 0,20% de permetrina). Cerca de 10 a 15 minutos após a aplicação, retire o lençol do quarto tratado, utilize uma pinça para coletar os mosquitos que pousaram nos lençóis brancos e coloque-os em uma placa de Petri com algodão umedecido. O número de pessoas que passaram a noite nos quartos selecionados também foi registrado. Os mosquitos coletados são rapidamente transferidos para um laboratório no local para processamento posterior.
No laboratório, todos os mosquitos coletados foram identificados morfologicamente até o gênero e espécie [36]. Anna's ovaries. gambiae SL usando um microscópio de dissecção binocular com uma gota de água destilada colocada em uma lâmina de vidro [35]. O estado de paridade foi avaliado para separar mulheres multíparas de nulíparas com base na morfologia ovariana e traqueal, bem como para determinar a taxa de fertilidade e a idade fisiológica [35].
O índice relativo é determinado testando a fonte de sangue recém-coletado. gambiae por ensaio imunoenzimático (ELISA) usando sangue de humanos, animais de criação (bovinos, ovinos, caprinos) e galinhas [40]. A infestação entomológica (IE) foi calculada usando estimativas de An. gambiae em mulheres SL na Gâmbia [41]. Além disso, a infecção por Plasmodium gambiae foi determinada analisando a cabeça e o tórax de mulheres multíparas usando o método ELISA de antígeno circunsporozoíto (CSP ELISA) [40]. Finalmente, os membros de Ann. gambiae foram identificados analisando suas pernas, asas e abdômen usando técnicas de reação em cadeia da polimerase (PCR) [34].
Os dados clínicos sobre malária foram obtidos do registro de consultas clínicas do Centro de Saúde de Napyeledugou, que abrange todas as quatro aldeias incluídas neste estudo (Kakologo, Kolekaha, Lofinekaha e Nambatiurkaha). A revisão do registro concentrou-se nos registros de março de 2018 a fevereiro de 2019 e de março de 2019 a fevereiro de 2020. Os dados clínicos de março de 2018 a fevereiro de 2019 representam os dados basais ou pré-intervenção com Bti, enquanto os dados clínicos de março de 2019 a fevereiro de 2020 representam os dados pré-intervenção com Bti. Os dados foram coletados após a intervenção com Bti. As informações clínicas, a idade e a aldeia de cada paciente nos grupos de estudo LLIN+Bti e LLIN foram obtidas no registro de saúde. Para cada paciente, foram registradas informações como aldeia de origem, idade, diagnóstico e patologia. Nos casos revisados neste estudo, a malária foi confirmada por teste rápido de diagnóstico (TRD) e/ou microscopia para malária após a administração de terapia combinada à base de artemisinina (ACT) por um profissional de saúde. Os casos de malária foram divididos em três faixas etárias (ou seja, 15 anos). A incidência anual de malária por 1000 habitantes foi estimada dividindo-se a prevalência de malária por 1000 habitantes pela população da aldeia.
Os dados coletados neste estudo foram digitados duas vezes em um banco de dados do Microsoft Excel e, em seguida, importados para o software de código aberto R [42], versão 3.6.3, para análise estatística. O pacote ggplot2 foi utilizado para gerar os gráficos. Modelos lineares generalizados utilizando regressão de Poisson foram usados para comparar a densidade larval e o número médio de picadas de mosquito por pessoa por noite entre os grupos de estudo. Medidas de razão de relevância (RR) foram utilizadas para comparar as densidades larvais médias e as taxas de picadas de mosquitos Culex e Anopheles. O grupo Gambia SL foi posicionado entre os dois grupos de estudo, utilizando o grupo LLIN + Bti como linha de base. Os tamanhos do efeito foram expressos como razões de chances (odds ratios) e intervalos de confiança de 95% (IC 95%). A razão (RR) do teste de Poisson foi utilizada para comparar as proporções e as taxas de incidência de malária antes e depois da intervenção com Bti em cada grupo de estudo. O nível de significância utilizado foi de 5%.
O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê Nacional de Ética em Pesquisa do Ministério da Saúde e Saúde Pública da Costa do Marfim (N/Ref: 001//MSHP/CNESVS-kp), bem como pelo distrito sanitário regional e pela administração de Korhogo. Antes da coleta de larvas e mosquitos adultos, foi obtido o consentimento livre e esclarecido por escrito dos participantes da pesquisa domiciliar, proprietários e/ou moradores. Os dados familiares e clínicos são anônimos e confidenciais, estando disponíveis apenas para os pesquisadores designados.
Um total de 1198 ninhos foram visitados. Desses ninhos pesquisados na área de estudo, 52,5% (n = 629) pertenciam ao grupo LLIN + Bti e 47,5% (n = 569) ao grupo apenas LLIN (RR = 1,10 [IC 95% 0,98–1,24], P = 0,088). Em geral, os habitats larvais locais foram classificados em 12 tipos, entre os quais a maior proporção de habitats larvais eram arrozais (24,5%, n = 294), seguidos por drenagem pluvial (21,0%, n = 252) e cerâmica (8,3%). %, n = 99), margem do rio (8,2%, n = 100), poça (7,2%, n = 86), poça (7,0%, n = 84), bomba de água da aldeia (6,8%, n = 81), pegadas de cascos (4,8%, n = 58), pântanos (4,0%, n = 48), cântaros (5,2%, n = 62), lagoas (1,9%, n = 23) e poços (0,9%, n = 11). ).
No total, foram coletadas 47.274 larvas de mosquito na área de estudo, com uma proporção de 14,4% (n = 6.796) no grupo LLIN + Bti em comparação com 85,6% (n = 40.478) no grupo LLIN isoladamente (RR = 5,96 [IC 95% 5,80–6,11], P ≤ 0,001). Essas larvas pertencem a três gêneros de mosquitos, sendo as espécies predominantes Anopheles (48,7%, n = 23.041), seguido por Culex spp. (35,0%, n = 16.562) e Aedes spp. (4,9%, n = 2.340). As pupas representaram 11,3% das moscas imaturas (n = 5.344).
Densidade média geral de larvas de Anopheles spp. Neste estudo, o número de larvas por coleta foi de 0,61 [IC 95% 0,41–0,81] L/mergulho no grupo LLIN + Bti e 3,97 [IC 95% 3,56–4,38] L/mergulho no grupo LLIN apenas (opcional). Arquivo 1: Figura S1). A densidade média de larvas de Anopheles spp. no grupo LLIN isolado foi 6,5 vezes maior que a do grupo LLIN + Bti (HR = 6,49; IC 95% 5,80–7,27; P < 0,001). Nenhum mosquito Anopheles foi detectado durante o tratamento. As larvas foram coletadas no grupo LLIN + Bti a partir de janeiro, correspondendo ao vigésimo tratamento com Bti. No grupo LLIN + Bti, houve uma diminuição significativa na densidade de larvas nos estágios iniciais e finais.
Antes do início do tratamento com Bti (março), a densidade média de larvas de Anopheles em estágios iniciais foi estimada em 1,28 [IC 95% 0,22–2,35] L/mergulho no grupo LLIN + Bti e 1,37 [IC 95% 0,36–2,36] L/mergulho no grupo LLIN + Bti. Após a aplicação do tratamento com Bti, a densidade média de larvas de Anopheles em estágios iniciais no grupo LLIN + Bti diminuiu gradualmente de 0,90 [IC 95% 0,19–1,61] para 0,10 [IC 95% 0,03–0,18] L/mergulho. As densidades de larvas de Anopheles em estágios iniciais permaneceram baixas no grupo LLIN + Bti. No grupo LLIN isolado, as flutuações na abundância de Anopheles spp. Larvas em estágios iniciais foram observadas com densidades médias variando de 0,23 [IC 95% 0,07–0,54] L/mergulho a 2,37 [IC 95% 1,77–2,98] L/mergulho. No geral, a densidade média de larvas de Anopheles em estágios iniciais no grupo tratado apenas com mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN) foi estatisticamente maior, com 1,90 [IC 95% 1,70–2,10] L/mergulho, enquanto a densidade média de larvas de Anopheles em estágios iniciais no grupo tratado com LLIN foi de 0,38 [IC 95% 0,28–0,47] L/mergulho. + grupo Bti (RR = 5,04; IC 95% 4,36–5,85; P < 0,001).
Alterações na densidade média de larvas de Anopheles. Mosquiteiros de estágios iniciais (A) e avançados (B) em um grupo de estudo de março de 2019 a fevereiro de 2020 na região de Napier, norte da Costa do Marfim. LLIN: rede mosquiteira impregnada com inseticida de longa duração; Bti: Bacillus thuringiensis, Israel; TRT: tratamento;
Densidade média de larvas de Anopheles spp. em estágio final no grupo LLIN + Bti. A densidade pré-tratamento com Bti foi de 2,98 [IC 95% 0,26–5,60] L/dip, enquanto a densidade no grupo LLIN isolado foi de 1,46 [IC 95% 0,26–2,65] l/dia. Após a aplicação de Bti, a densidade de larvas de Anopheles em estágio final no grupo LLIN + Bti diminuiu de 0,22 [IC 95% 0,04–0,40] para 0,03 [IC 95% 0,00–0,06] L/dip (Fig. 2B). No grupo tratado apenas com mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN), a densidade de larvas de Anopheles em estágio final aumentou de 0,35 [IC 95% -0,15-0,76] para 2,77 [IC 95% 1,13-4,40] l/mergulho, com algumas variações na densidade larval dependendo da data da amostragem. A densidade média de larvas de Anopheles em estágio final no grupo tratado apenas com LLIN foi de 2,07 [IC 95% 1,84-2,29] l/mergulho, nove vezes maior que 0,23 [IC 95% 0,11-0,36] l/imersão no grupo tratado com LLIN + Bti (RR = 8,80; IC 95% 7,40-10,57; P < 0,001).
A densidade média de Culex spp. foi de 0,33 [IC 95% 0,21–0,45] L/dip no grupo LLIN + Bti e de 2,67 [IC 95% 2,23–3,10] L/dip no grupo LLIN isolado (arquivo adicional 2: Figura S2). A densidade média de Culex spp. no grupo LLIN isolado foi significativamente maior do que no grupo LLIN + Bti (HR = 8,00; IC 95% 6,90–9,34; P < 0,001).
A densidade média do gênero Culex spp. antes do tratamento com Bti foi de 1,26 [IC 95% 0,10–2,42] l/dip no grupo LLIN + Bti e de 1,28 [IC 95% 0,37–2,36] no grupo apenas com LLIN (Fig. 3A). Após a aplicação do tratamento com Bti, a densidade de larvas jovens de Culex diminuiu de 0,07 [IC 95% -0,001–0,00] para 0,25 [IC 95% 0,006–0,51] l/dip. Nenhuma larva de Culex foi coletada nos habitats larvais tratados com Bti a partir de dezembro. A densidade de larvas iniciais de Culex foi reduzida para 0,21 [IC 95% 0,14–0,28] L/imersão no grupo LLIN + Bti, mas foi maior no grupo LLIN isolado, com 1,30 [IC 95% 1,10–1,50] l/imersão.gota/dia. A densidade de larvas iniciais de Culex no grupo LLIN isolado foi 6 vezes maior do que no grupo LLIN + Bti (RR = 6,17; IC 95% 5,11–7,52; P < 0,001).
Alterações na densidade média de larvas de Culex spp. Ensaios de fase inicial (A) e fase inicial (B) em um grupo de estudo de março de 2019 a fevereiro de 2020 na região de Napier, norte da Costa do Marfim. Rede mosquiteira impregnada com inseticida de longa duração (LLIN), Bacillus thuringiensis Israel (Bti), tratamento com Trt.
Antes do tratamento com Bti, a densidade média de larvas de Culex em estágios finais no grupo LLIN + Bti e no grupo LLIN foi de 0,97 [IC 95% 0,09–1,85] e 1,60 [IC 95% 0,16–3,37] l/imersão, respectivamente (Fig. 3B). Densidade média de larvas de Culex em estágios finais após o início do tratamento com Bti. A densidade no grupo LLIN + Bti diminuiu gradualmente e foi menor do que no grupo LLIN isolado, que permaneceu muito alta. A densidade média de larvas de Culex em estágios finais foi de 0,12 [IC 95% 0,07–0,15] L/imersão no grupo LLIN + Bti e 1,36 [IC 95% 1,11–1,61] L/imersão no grupo LLIN isolado. A densidade média de larvas de Culex em estágios finais foi significativamente maior no grupo tratado apenas com mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN) do que no grupo tratado com LLIN + Bti (RR = 11,19; IC 95% 8,83–14,43; P < 0,001).
Antes do tratamento com Bti, a densidade média de pupas por joaninha era de 0,59 [IC 95% 0,24–0,94] no grupo LLIN + Bti e de 0,38 [IC 95% 0,13–0,63] no grupo LLIN isolado (Figura 4). A densidade pupal total foi de 0,10 [IC 95% 0,06–0,14] no grupo LLIN + Bti e de 0,84 [IC 95% 0,75–0,92] no grupo LLIN isolado. O tratamento com Bti reduziu significativamente a densidade pupal média no grupo LLIN + Bti em comparação com o grupo LLIN isolado (OR = 8,30; IC 95% 6,37–11,02; P < 0,001). No grupo LLIN + Bti, nenhuma pupa foi coletada após novembro.
Alterações na densidade média de pupas. O estudo foi conduzido de março de 2019 a fevereiro de 2020 na região de Napier, no norte da Costa do Marfim. Rede mosquiteira impregnada com inseticida de longa duração (LLIN), Bacillus thuringiensis (Bti), tratamento com Trt.
Um total de 3456 mosquitos adultos foram coletados na área de estudo. Os mosquitos pertencem a 17 espécies de 5 gêneros (Anopheles, Culex, Aedes, Eretmapodites) (Tabela 1). Entre os vetores da malária, An. gambiae sl foi a espécie mais abundante, com uma proporção de 74,9% (n = 2587), seguida por An. gambiae sl. funestus (2,5%, n = 86) e An. nli (0,7%, n = 24). A abundância de An. gambiae sl. no grupo LLIN + Bti (10,9%, n = 375) foi menor do que no grupo LLIN isolado (64%, n = 2212). Indivíduos de An. nli foram encontrados apenas no grupo LLIN. No entanto, An. gambiae e An. funestus estavam presentes tanto no grupo LLIN + Bti quanto no grupo LLIN isolado.
Em estudos iniciados antes da aplicação de Bti no criadouro (3 meses), o número médio geral de mosquitos noturnos por pessoa (m/p/n) no grupo LLIN + Bti foi estimado em 0,83 [IC 95% 0,50–1,17], enquanto no grupo LLIN somente com Bti foi de 0,72 [IC 95% 0,41–1,02] (Fig. 5). No grupo LLIN + Bti, os danos causados por mosquitos Culex diminuíram e permaneceram baixos, apesar de um pico de 1,95 [IC 95% 1,35–2,54] m/p em setembro, após a 12ª aplicação de Bti. No entanto, no grupo LLIN somente com Bti, a taxa média de picadas de mosquito aumentou gradualmente antes de atingir um pico em setembro, com 11,33 [IC 95% 7,15–15,50] m/p. A incidência geral de picadas de mosquito foi significativamente menor no grupo LLIN + Bti em comparação com o grupo LLIN isolado em todos os momentos do estudo (HR = 3,66; IC 95% 3,01–4,49; P < 0,001).
Taxas de picadas da fauna de mosquitos na área de estudo da região de Napier, no norte da Costa do Marfim, de março de 2019 a fevereiro de 2020. LLIN (Rede mosquiteira impregnada com inseticida de longa duração), Bti (Bacillus thuringiensis), tratamento Trt, picadas b/p/noite/humano/noite
O Anopheles gambiae é o vetor de malária mais comum na área do estudo. A velocidade de picada do An. Na linha de base, as mulheres gambianas apresentaram valores de b/p/n de 0,64 [IC 95% 0,27–1,00] no grupo LLIN + Bti e 0,74 [IC 95% 0,30–1,17] no grupo apenas LLIN (Fig. 6). Durante o período de intervenção com Bti, a maior atividade de picada foi observada em setembro, correspondendo ao décimo segundo ciclo de tratamento com Bti, com um pico de 1,46 [IC 95% 0,87–2,05] b/p/n no grupo LLIN + Bti e um pico de 9,65 [IC 95% 0,87–2,05] w/n no grupo apenas LLIN. A velocidade geral de picada do An. A taxa de infecção na Gâmbia foi significativamente menor no grupo LLIN + Bti (0,59 [IC 95% 0,43–0,75] b/p/n) do que no grupo LLIN isolado (2,97 [IC 95% 2,02–3,93] b/p/n). (RR = 3,66; IC 95% 3,01–4,49; P < 0,001).
Velocidade de mordida de Anna. gambiae sl, unidade de pesquisa na região de Napier, norte da Costa do Marfim, de março de 2019 a fevereiro de 2020. Mosquiteiro de longa duração tratado com inseticida (LLIN), Bti Bacillus thuringiensis Israel, tratamento Trt, mordidas b/p/noite/pessoa/noite
Total de 646 ampères. A Gâmbia está desmembrada. No geral, a porcentagem de segurança local. As taxas de paridade na Gâmbia foram geralmente superiores a 70% durante todo o período do estudo, com exceção de julho, quando apenas o grupo LLIN foi utilizado (Arquivo adicional 3: Figura S3). No entanto, a taxa média de fertilidade na área do estudo foi de 74,5% (n = 481). No grupo LLIN+Bti, a taxa de paridade permaneceu em um nível elevado, acima de 80%, com exceção de setembro, quando a taxa de paridade caiu para 77,5%. Contudo, variações nas taxas médias de fertilidade foram observadas no grupo apenas com LLIN, sendo a menor taxa média de fertilidade estimada em 64,5%.
Um estudo de unidades individuais de sangue da Gâmbia revelou que 80,5% (n = 313) eram de origem humana, 6,2% (n = 24) das mulheres consumiram sangue misto (humano e doméstico) e 5,1% (n = 20) consumiram sangue proveniente de ração animal (bovinos, ovinos e caprinos), e 8,2% (n = 32) das amostras analisadas apresentaram resultado negativo para sangue ingerido. No grupo LLIN + Bti, a proporção de mulheres que receberam sangue humano foi de 25,7% (n = 100), em comparação com 54,8% (n = 213) no grupo LLIN apenas (Arquivo adicional 5: Tabela S5).
Um total de 308 ampolas de P. gambiae foram testadas para identificar membros do complexo de espécies e infecção por P. falciparum (Arquivo adicional 4: Tabela S4). Duas “espécies relacionadas” coexistem na área de estudo, nomeadamente An. gambiae ss (95,1%, n = 293) e An. coluzzii (4,9%, n = 15). A prevalência de Anopheles gambiae ss foi significativamente menor no grupo LLIN + Bti do que no grupo LLIN isolado (66,2%, n = 204) (RR = 2,29 [IC 95% 1,78–2,97], P < 0,001). Uma proporção semelhante de mosquitos Anopheles foi encontrada no grupo LLIN + Bti (3,6%, n = 11) e no grupo LLIN isolado (1,3%, n = 4) (RR = 2,75 [IC 95% 0,81–11,84], P = 0,118). A prevalência de infecção por Plasmodium falciparum entre An. SL na Gâmbia foi de 11,4% (n = 35). Taxas de infecção por Plasmodium falciparum. A taxa de infecção na Gâmbia foi significativamente menor no grupo LLIN + Bti (2,9%, n = 9) do que no grupo LLIN isolado (8,4%, n = 26) (RR = 2,89 [IC 95% 1,31–7,01], P = 0,006). Em comparação com os mosquitos Anopheles, os mosquitos Anopheles gambiae apresentaram a maior proporção de infecção por Plasmodium, com 94,3% (n=32). Já os mosquitos Anopheles coluzzii apresentaram apenas 5,7% (n = 5) (RR = 6,4 [IC 95% 2,47–21,04], P < 0,001).
Um total de 2.435 pessoas de 400 domicílios foram pesquisadas. A densidade média é de 6,1 pessoas por domicílio. A taxa de posse de mosquiteiros impregnados com inseticida de longa duração (LLIN) entre os domicílios foi de 85% (n = 340), em comparação com 15% (n = 60) para domicílios sem LLIN (RR = 5,67 [IC 95% 4,29–7,59], P < 0,001) (Arquivo adicional 5: Tabela S5). O uso de LLIN foi de 40,7% (n = 990) no grupo LLIN + Bti, em comparação com 36,2% (n = 882) no grupo LLIN isoladamente (RR = 1,12 [IC 95% 1,02–1,23], P = 0,013). A taxa média geral de utilização líquida na área do estudo foi de 38,4% (n = 1842). A proporção de crianças menores de cinco anos que utilizavam a internet foi semelhante nos dois grupos de estudo, com taxas de uso líquido de 41,2% (n = 195) no grupo LLIN + Bti e 43,2% (n = 186) no grupo apenas LLIN (HR = 1,05 [IC 95% 0,85–1,29], P = 0,682). Entre as crianças de 5 a 15 anos, não houve diferença nas taxas de uso líquido entre 36,3% (n = 250) no grupo LLIN + Bti e 36,9% (n = 250) no grupo apenas LLIN (RR = 1,02 [IC 95% 1,02–1,23], P = 0,894). No entanto, aqueles com mais de 15 anos de idade usaram mosquiteiros 42,7% (n = 554) menos frequentemente no grupo LLIN + Bti do que 33,4% (n = 439) no grupo apenas LLIN (RR = 1,26 [IC 95% 1,11–1,43], P <0,001).
Um total de 2.484 casos clínicos foram registrados no Centro de Saúde de Napier entre março de 2018 e fevereiro de 2020. A prevalência de malária clínica na população geral foi de 82,0% de todos os casos de patologia clínica (n = 2.038). As taxas de incidência local anual de malária nesta área de estudo foram de 479,8‰ e 297,5‰ antes e depois do tratamento com Bti (Tabela 2).
Data da publicação: 01/07/2024